Total RNA Purification Maxi Kit – 8 preps
货号: 26800 产品名称: Total RNA Purification Maxi Kit – 8 preps 品牌: Norgen 规格: 8 preps
17000 ProteoSpin CBED Maxi Kit 品牌 Norgen
ProteoSpin CBED Maxi Kit
货号: 17000 产品名称: ProteoSpin CBED Maxi Kit 品牌: Norgen 规格: 4 preps
22200 ProteoSpin Endotoxin Removal Maxi Kit – For Proteins and Peptides 品牌 Norgen
ProteoSpin Endotoxin Removal Maxi Kit – For Proteins and Peptides
货号: 22200 产品名称: ProteoSpin Endotoxin Removal Maxi Kit – For Proteins and Peptides 品牌: Norgen 规格: 4 preps
43600 ProteoSpin Endotoxin Removal Maxi Kit – For Proteins and Peptides 品牌 Norgen
ProteoSpin Endotoxin Removal Maxi Kit – For Proteins and Peptides
货号: 43600 产品名称: ProteoSpin Endotoxin Removal Maxi Kit – For Proteins and Peptides 品牌: Norgen 规格: 24 preps
50100 Urine DNA Isolation Maxi Kit (slurry format) 品牌 Norgen
Urine DNA Isolation Maxi Kit (slurry format)
货号: 50100 产品名称: Urine DNA Isolation Maxi Kit (slurry format) 品牌: Norgen 规格: 50 preps
21900 Endotoxin Removal Kit (Maxi) – For DNA 品牌 Norgen
Endotoxin Removal Kit (Maxi) – For DNA
货号: 21900 产品名称: Endotoxin Removal Kit (Maxi) – For DNA 品牌: Norgen 规格: 4 preps
40004 0.22 um filter maxi column 品牌 Norgen
0.22 um filter maxi column
货号: 40004 产品名称: 0.22 um filter maxi column 品牌: Norgen 规格: 20/bag
40005 0.22 um filter maxi column 品牌 Norgen
0.22 um filter maxi column
货号: 40005 产品名称: 0.22 um filter maxi column 品牌: Norgen 规格: 100/bag
40006 0.45 um filter maxi column 品牌 Norgen
0.45 um filter maxi column
货号: 40006 产品名称: 0.45 um filter maxi column 品牌: Norgen 规格: 20/bag
40007 0.45 um filter maxi column – 100 Units 品牌 Norgen
0.45 um filter maxi column – 100 Units
货号: 40007 产品名称: 0.45 um filter maxi column – 100 Units 品牌: Norgen 规格: 100/bag
12865 CompactPrep Plasmid Maxi Kit (100) 品牌 Qiagen
CompactPrep Plasmid Maxi Kit (100)
货号: 12865 产品名称: CompactPrep Plasmid Maxi Kit (100) 品牌: Qiagen 规格: ***
12863 CompactPrep Plasmid Maxi Kit (25) 品牌 Qiagen
CompactPrep Plasmid Maxi Kit (25)
货号: 12863 产品名称: CompactPrep Plasmid Maxi Kit (25) 品牌: Qiagen 规格: ***
68163 DNeasy Plant Maxi Kit (24) 品牌 Qiagen
DNeasy Plant Maxi Kit (24)
货号: 68163 产品名称: DNeasy Plant Maxi Kit (24) 品牌: Qiagen 规格: ***
A7878_0010 Geno/maxi AX DNA Isolation Spin-Kit 品牌 AppliChem
Geno/maxi AX DNA Isolation Spin-Kit
货号: A7878_0010 产品名称: Geno/maxi AX DNA Isolation Spin-Kit 品牌: AppliChem 规格: 10Isol.
12362 现货|EndoFree Plasmid Maxi Kit (10) 品牌 Qiagen
现货|EndoFree Plasmid Maxi Kit (10)
货号: 12362 产品名称: 现货|EndoFree Plasmid Maxi Kit (10) 品牌: Qiagen 规格: 10T 现货 核酸纯化
EndoFree Plasmid Maxi Kit
纯化得到多至 500 ug无内毒素高转染级纯质粒或科斯质粒DNA
纯化得到的DNA 内毒素低于0.1 EU/µg
包括LyseBlue 试剂优化操作,确保产量
获得高产量的高拷贝质粒DNA
使用LyseBlue,获得最佳的裂解和最大的DNA产量
EndoFree Plasmid Maxi Kit 将高效去除内毒素整合入质粒纯化,无需额外的抽提或亲和层析去除脂多糖。通过QIAfilter Mega-Giga预制试剂条过滤清楚细菌裂解液,在重力流QIAGEN-tip 500 阴离子交换柱上纯化质粒,EndoFree Plasmid Maxi Kit 规格
背景
内毒素,也称作脂多糖或LPS,使革兰氏阴性菌的细胞膜组分,如 E. coli (见图“E.coli 细胞膜图示”)。在抽提质粒过程中的裂解阶段会释放内毒素,它会降低敏感细胞系的转染效率(见图“质粒纯化方法 vs. 转染效率”和 “质粒纯化 vs. 转染效率”及表格“质粒制备的内毒素水平”和“用EndoFree 抽提的 DNA 确保原代细胞高效转染”)。此外,内毒素可以影响转染过程中质粒DNA的吸收, 这是由于它会与DNA竞争转染试剂。内毒素也会激活诸如巨噬细胞和B细胞等免疫细胞中的非特异性免疫反应,导致错误干扰转染结果。这些反应包括合成蛋白和脂质体,如 IL-1 和前列腺素。综上所述,内毒素是转染实验构建中一种不可控制的变量,可影响转染结果的成功率和可重复性,致使转染实验难以比较和说明。在基因治疗研究中,内毒素会引起内毒素休克综合症、促动补体分支,从而造成干扰。
原理
抽提所得质粒DNA的内毒素水平取决于纯化方法(见表格“质粒的内毒素水平”)。泥浆式硅胶法制备的DNA的内毒素水平非常高。QIAGEN、QIAfilter 和HiSpeed Plasmid Kits 以及 2x CsCl超离心法可制备高纯度的DNA,内毒素水平非常低。EndoFree Plasmid Kits 包含整合的内毒素去除步骤,可制备内毒素 <0.1 EU/µg的质粒DNA。
QIAfilter、HiSpeed 和 EndoFree Plasmid Kits中提供的QIAfilter Cartridges是一种独特设计的过滤器,可代替细菌细胞碱裂解后的离心步骤。QIAfilter Cartridges 可完全去除SDS沉淀,清除细菌裂解液,相比离心可节约很多时间。 QIAfilter Midi 和 Maxi Cartridges 是注射器规格(见图“QIAfilter Midi Cartridge”)通过推动可使液体通过过滤器。
IAGEN纯化柱使用独特的阴离子交换树脂,专用于纯化核酸。创新的分离技术确保DNA纯度等同于甚至高于两次 CsCl梯度离心法制备的DNA。 预装的纯化柱以重力流的方式制备,不会流干,将质粒制备的手动时间降至最少。QIAGEN整个质粒制备系统避免使用有毒物质,诸如苯酚、氯仿、 ethidium bromide和CsCl,将对环境和用户的危害降至最低。
过程
在碱性条件下裂解细菌细胞,应用 QIAfilter Mega-Giga Cartridge过滤裂解液(见图“QIAfilter Mega-Giga Cartridge”)。在滤液中加入内毒素去除液,置于冰上孵育。然后将滤液装到阴离子交换柱上,在合适的盐浓度和pH值条件下,质粒DNA会选择性地结合到阴离子交换柱上。RNA、蛋白、代谢物和其他小分子组分通过中等盐浓度去除,应用高盐浓度缓冲夜可洗脱超纯的质粒 DNA(见操作流程)。应用异丙醇沉淀浓缩DNA,离心后可获得DNA。
应用
EndoFree Plasmid Kits可制备不含内毒素的DNA,非常符合转染实验高度可重复性和高效率的要求 (见图“质粒纯化方法 vs. 转染效率”和“质粒纯度 vs. 转染效率”以及表格“各种方法制备的质粒内毒素水平比较”和“不含内毒素的DNA确保原代细胞高效转染”)。应用 QIAGEN试剂盒制备的不含内毒素的超纯DNA也适用于基因治疗研究和基因疫苗(见“超纯的100 纯化柱”)及其他高灵敏度应用。
RT
12663 |HiSpeed Plasmid Maxi Kit (25) 品牌 Qiagen
|HiSpeed Plasmid Maxi Kit (25)
货号: 12663 产品名称: |HiSpeed Plasmid Maxi Kit (25) 品牌: Qiagen 规格: *** 现货
HiSpeed Plasmid Maxi Kit
超快速纯化多至750 µg质粒或粘粒DNA
从细胞培养物纯化得到超纯的DNA,不超过60分钟
无需离心即可去除裂解液中的不溶物并进行异丙醇沉淀
在沉淀过程中,不会损失DNA沉淀
最多获得750 µg (Maxi)高拷贝质粒DNA
使用LyseBlue,获得最佳的裂解和最大的DNA产量
RT
12961 QIAGEN Plasmid Plus Maxi Sample Kit (5) 品牌 Qiagen
QIAGEN Plasmid Plus Maxi Sample Kit (5)
货号: 12961 产品名称: QIAGEN Plasmid Plus Maxi Sample Kit (5) 品牌: Qiagen 规格: ***
MB010_0015MAXI maxXmore AX Maxi 品牌 AppliChem
maxXmore AX Maxi
货号: MB010_0015MAXI 产品名称: maxXmore AX Maxi 品牌: AppliChem 规格: 1Kit
19763 QIAfilter Maxi Cartridges (25) 品牌 Qiagen
QIAfilter Maxi Cartridges (25)
货号: 19763 产品名称: QIAfilter Maxi Cartridges (25) 品牌: Qiagen 规格: ***
12262 现货|QIAfilter Plasmid Maxi Kit (10) 品牌 Qiagen
现货|QIAfilter Plasmid Maxi Kit (10)
货号: 12262 产品名称: 现货|QIAfilter Plasmid Maxi Kit (10) 品牌: Qiagen 规格: *** 现货
无