供原装|QIAGEN Large-Construct Kit (10)

货号： 12462      产品名称： 供原装|QIAGEN Large-Construct Kit (10)   品牌： Qiagen 规格： 10T 大量现货 核酸纯化

QIAGEN Large-Construct Kit
纯化至多50μg的BAC、PAC、P1或最多可达200ug的粘粒DNA，无基因组DNA污染
高效去除基因组DNA污染
转染级别纯度的高分子量DNA
快速简单的操作
原理
此试剂盒运用重力沉降原理，纯化高分子量DNA；产物DNA的纯度比其他常用方法得到的DNA的纯度高。该试剂盒自带独特的ATP外切酶消化过程，可高效的去除基因组DNA（参见 "Efficient Removal of Genomic DNA"）。
QIAGEN Large-Construct Kit含有的QIAGEN-tips中独特的离子交换树脂专为核酸纯化设计。其出色的核酸分离特性可纯化得到高纯度DNA，相当于经过两次氯化铯梯度离心得到的纯度。该试剂盒中含有的QIAGEN-tips（参见"QIAGEN Plasmid Kit Anion-Exchange Tips"）运用重力沉降原理，减少了质粒制备过程所需的手工操作的时间。QIAGEN质粒纯化系统不使用苯酚、氯仿、溴乙锭和氯化铯等有毒物质，最大程度上减小了对使用者及环境的危害。
流程
使用碱裂解法裂解至多500 ml的培养液后，使用试剂盒中含ATP的外切酶进行消化，确保特异性去除基因组DNA（参见"Efficient Removal of Genomic DNA"）及缺损的高分子量DNA。
之后将样本上样至离子交换柱，在合适的盐浓度和pH值溶液中，高分子量DNA与树脂特异性结合（参见 "Comparison of QIAGEN Plasmid Kit Procedures"）。用中等盐浓度的缓冲液洗涤，去除RNA、蛋白质、代谢物和其他小分子的杂质。用高盐缓冲液洗脱已去除基因组DNA的纯化DNA。加入异丙醇使DNA脱盐，之后离心收集。 
应用
产物不含基因组DNA可确保DNA的量准确可靠，适用于敏感的下游实验。纯化的高分子量DNA适用于以下应用，包括：
亚克隆与鸟枪法制备DNA文库
对高分子量DNA直接进行测序
转染

RT